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基因扩增热循环仪

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简介

基因扩增热循环仪(即PCR仪,全称Polymerase Chain Reaction Instrument)是分子生物学实验室中用于体外扩增DNA或RNA的核心设备。其核心功能是通过精确控制温度变化,实现DNA聚合酶链式反应(PCR)的重复循环,从而将目标基因片段快速扩增数百万倍。以下是关于其原理、分类、技术特点及应用的详细介绍:


一、核心原理

PCR技术依赖温度循环完成三个关键步骤:


变性(Denaturation):加热至94~98℃使DNA双链解旋为单链。

退火(Annealing):降温至50~65℃使引物与靶序列特异性结合。

延伸(Extension):升温至72℃由DNA聚合酶催化合成新链。

热循环仪通过精准控温系统(如半导体制冷、加热模块)快速切换温度,实现上述步骤的自动化重复。


二、主要类型

类型 特点 适用场景

普通PCR仪 基础款,支持96孔标准板,温度均匀性±0.3℃以内,最高升温/降温速率约3℃/秒 常规基因扩增、教学实验室

梯度PCR仪 可设置不同退火温度梯度(如12列×4种温度),优化引物最佳退火条件 新引物筛选、复杂模板扩增

荧光定量PCR仪(qPCR) 集成荧光检测系统(如SYBR Green、TaqMan探针),实时监测扩增曲线 基因表达分析、病原体检测

高分辨率熔解曲线PCR仪 支持高精度熔解曲线分析(±0.01℃),区分等位基因差异(如SNP分型) 基因分型、突变检测

实时荧光定量PCR仪 支持多通道检测(如FAM/VIC/ROX/CY5),兼容多种荧光染料和探针技术 临床诊断、微量DNA分析

三、关键技术参数

控温性能


温度范围:通常覆盖4~100℃,满足变性、退火、延伸需求。

升温/降温速率:高端型号可达≥5℃/秒(如Applied Biosystems Veriti),缩短循环时间。

温度均匀性:±0.2℃以内(如Bio-Rad CFX系列),确保96孔同步准确反应。


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